紫茎泽兰提取物对小鼠肝乙酰胆碱转移酶的影响

材料与方法

1.1 材料

紫茎泽兰的乙醇提取液（2g/ml纯浓液和1g/ml稀释一倍）。左缺诺孕酮炔雌醚，华润紫竹药业有限公司[8]。各种酶购于南京建成科技有限公司。

1.2 方法

1.2.1 测定方法

蛋白质测定用考马斯亮蓝法，乙酰胆碱转移酶活力测定采用乙酰胆碱转移酶测试盒[9]。

1.2.2 喂药方法

将24只老鼠分成四组，对照组6只小鼠不灌胃药只提供和别的小组实验同样的水和饲料，2g/ml紫茎泽兰浓度和1g/ml紫茎泽兰浓度各5只，为公鼠，左缺诺孕酮炔雌醚组5只，为母鼠。从第一天8月3号解剖第一次的，8月4号开始灌胃的四组小鼠中的三组要灌胃对应药物的，6天后中各取一只进行解剖测定，记录数据。同时剩下的三组要灌胃药物的鼠都分别灌胃2g/ml紫茎泽兰，1g/ml紫茎泽兰，左缺诺孕酮炔雌醚，同时对照组和其他组一样继续保持供水和饲料。6天后，重复过程，先解剖测量，记录数据，再灌胃。灌胃三次，最后一次测定后不进行灌胃等鼠恢复6天再进行解剖测定。

1.2.3 样品制备方法

每组取一只小鼠，解剖，快速取其肝脏，用人工研磨方法，在冰块上充分研磨，并按照测试盒要求加入超纯水混匀，提取需要的部分和含量在离心机上进行设置好的转速和时间离心。取上清液先测定蛋白质的含量，然后按照测试盒中测定小鼠肝脏乙酰胆碱转移酶酶的活力。

2 实验结果

2.1小鼠肝中的乙酰胆碱转移酶含量方差分析表

通过方差分析得知，FA=7.70471，FB=5.298761，对于药剂的影响，由于dfA=3，dfe=12查F值表得，F0.05=3.49 F0.01=5.95，FA>F0.01，P<0.01，表明药剂对小鼠体内的肝中的乙酰胆碱转移酶的影响差异极显著，对于持续时间，根据dfB=4，dfe=12，查F值表得，F0.05=3.26 F0.01=5.41，F0.05

2.2.小鼠肾和肝中的的乙酰胆碱转移酶活力

乙酰胆碱转移酶活力在小鼠肝中与不同的药剂的影响是差异极显著，就是小鼠肝中的乙酰胆碱转移酶活力与不同药剂作用的影响有关，而在乙酰胆碱转移酶活力在小鼠肝中与灌胃药物持续时间的影响是差异显著，那就有95%的把握说小鼠肝中的乙酰胆碱转移酶活力与灌胃药物持续时间有关，这从侧面也验证了小鼠的肾和肝的作用，功能不一样，在解毒方面肝的作用要更大。

2.3不同药剂对小鼠肝中的乙酰胆碱转移酶活力影响趋势

图1可以看出，小鼠肝中乙酰胆碱转移酶活力在没有喂药时基本一致，药剂中2g/ml浓度的紫茎泽兰在第一次喂药之后对肝中的乙酰胆碱转移酶活力的影响是在没有喂药的空白对照组的较低水平上的，第二次喂药后含量开始快速上升，但还是低于空白对照组的数值，第三次含量持续上升，但一直都是低于对照组的，当不喂药时含量就开始有一些下降。左缺孕酮避孕药对小鼠肝中的乙酰胆碱转移酶活力的影响是在第一次喂药比没有喂药的空白对照低出很多，第二次喂药后即有显著上升，第三次继续上升，但数值一直低于空白对照组的活力，停止喂药乙酰胆碱转移酶活力的水平出现急剧下降。1g/ml浓度的紫茎泽兰组在第一次喂药后，与空白对照相比就远远的低于对照水平，第二次喂药后含量保持上升，第三次喂药活力上升的速率要慢一点，至喂药截止恢复期时还在上升，但它的数值始终在对照组水平之下。2g/ml浓度的紫茎泽兰和左缺孕酮避孕药变化趋势基本一致，出现的乙酰胆碱转移酶活力变化趋势较大。1g/ml濃度的紫茎泽兰从第一次喂药至第三次喂药都是呈现上升趋势，乙酰胆碱转移酶活力的总体变化趋势是较大的。但三种药剂的乙酰胆碱转移酶都是始终低于对照组的乙酰胆碱转移酶活力的。

3.结论

紫茎泽兰提取物对小鼠体内肝中的乙酰胆碱转移酶活力有显著性，其他的各项变化均无显著性差异，所以紫茎泽兰的2g/ml，1g/ml浓度和左缺诺孕酮炔雌醚对小鼠有轻微的影响但基本不构成危害[13]。而1g/ml浓度的紫茎泽兰则对小鼠的影响要更小。所以紫茎泽兰和左缺诺孕酮炔雌醚对小鼠影响不大，与参考文献中对小鼠的的肝肾有损害，且有轻微中毒现象[14]基本一致，以此作为紫茎泽兰环保型杀虫剂的毒性试验的依据。

参考文献：

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作者简介：

#为并列第一作者

*为通讯作者

第一和通讯作者简介：

农向：男，1980.11，博士，副教授，研究方向为天然药物和林业病虫害，

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