字母代替数字分析限制酶对DNA切后的结果确定酶切点及图谱

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例1为了解基因结构,通常选取一特定长度的线性DNA分子,先用一种限制酶切割,通过电泳技术将单酶水解片段分离,计算相对大小,然后再用另一种限制酶对单酶水解片段进行降解,分析片断大小,下表是某小组进行的相关实验。

已知一线性DNA序列共有5000bp(bp为碱基对)第一步水解产物

单位(bp)第二水解产物

单位(bp)

A酶切割2100将第一步水解产物分离后,分别用B酶切割。1900200

1400800600

1000100

500500

B酶切割2500将第一步水解产物分离后分别用A酶切割。1900600

1300800500

12001000200

经A酶和B酶同时切割19001000800600500200

根据表中数据,请用图示标出酶切位点,并标明相关片断的大小。

解析:限制酶有专一性,且经A酶和B酶同时切割有6段。

为了方便设1900=x 200=y800=m600=n 1000=p500=q,则根据先A酶后B酶,先B酶后A酶的结果则有:

x+y=2100① x+n=2500② m+n=1400③

m+q=500④p+y=1200⑤

根据①②则有x y n的排列可能序列是:

⑥ n x y

y x n

同理,根据③④则有m n q的可能序列是:

⑦ n mq

qm n

则根据⑥和⑦及⑤则有排序:

qmnxyp

那么片段的顺序及酶的切割点应是

例2现有一长度为3000个碱基对(bp)的线性DNA分子,用限制酶切后,进行凝胶电脉,使降解产物分开,用H酶单独酶切,结果如图I,用酶B单独切,结果如图2,用酶和酶B同时酶切结果如图3,请用图标出该DNA分子的结构及酶切图谱。

解析:用H酶和B酶同时切,有600bp、400bp、1400bp,根据题意只有三段是不行的,必须有四段,故可能有两段是重复的,则只有600bp片段有两段,且B酶切割只能在H酶切割的两则:

设x=400bp y=600 bp p=1400bp

则片段的排列可能有:

则按顺序排列有:

x+y=1000bpx+y=1000bp

① y+p=2000bp ③ p+y=2000bp

y+x=1000bpy+x=1000bp

② y+p=2000bp ④ p+y=2000bp

通过分析只有③的排列合符题意。

即DNA分子的结构及其酶切图谱是:

总结:通过用字母代替数字再根据题意进行分析,感觉就不抽象,思路就清晰具体。

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