摘 要:选取南逗迈4号芒成花前后的顶芽进行转录组测序,在构建的cDNA文库中获得一条表达量变化明显的cDNA,经分析该cDNA属于MADS-box基因家族,命名为MADS1基因,该基因全长为1377bp,编码459个氨基酸。通过NCBI网站的blast功能分析发现其具有MADS基因家族典型的MADS结构域和K-box结构域、DNA结合位点、磷酸化位点、二聚体接口;氨基酸同源性比较发现其与番木瓜的MADS1基因具有较高的相似性,推测它们可能为同源基因,具有相似的生物学功能。
关键词:芒果 MADS1基因 生物信息学
MADS-box基因编码的蛋白是植物中一类转录因子,在调节植物生长发育尤其是花发育中发挥重要作用[1]。MADS1基因是MADS基因家族成员之一,研究表明MADS1基因可能与植物生殖生长有关[2]。目前,已从棉花[3]、毛白杨[4]、番茄[5]、朵丽蝶兰[6]等多个物种中克隆到MADS1基因并对其进行序列分析,以期研究其在该研究物种中的功能。
笔者在前期研究芒果成花转录组数据中获得MADS1基因序列,研究对MADS1基因序列进行相关生物信息学分析,以期为芒果成花分子调控机制研究提供资料。
1 材料与方法
1.1 材料
选取南逗迈4号芒成花前后的顶芽进行转录组测序,在构建的cDNA文库中获得一条表达量变化明显的cDNA,该cDNA属于MADS-box基因家族,命名为MADS1基因。
1.2 方法
在NCBI网站上通过BLAST功能对该基因进行保守结构域分析并获得其他物种MADS1基因序列,利用DNA MAN软件进行核苷酸和氨基酸多序列比对,构建系统进化树。
2 结果与分析
2.1 MADS1同源基因核苷酸序列比对分析
用前期获得的MADS1基因序列与NCBI上已登录的来自银杏(Ginkgo biloba)、板栗(Castanea mollissima)、荔枝(Litchi chinensis)、番木瓜(Carica papaya)、葡萄(Vitis vinifera)、欧洲榛(Corylus avellana)、甜樱桃(Prunus avium)和野芭蕉(Musa acuminata)的MADS1基因进行核苷酸序列比对。从表1可以看出,芒果与这8个物种的MADS1基因同源性基本在40 %~50 %,其中与银杏和板栗的相似性较高达到54.8 %。
2.2 芒果MADS1基因氨基酸结构分析
芒果MADS1基因全长1377bp,用NCBI网站中BLAST分析其结构,结果表明,该基因共编码459个氨基酸,其中212-290段序列为保守的MADS结构域,292-375段序列为K-box结构域,这两个结构域都是MADS-box基因家族典型的结构。同时,从图1中可以看出该基因还有DNA结合位点、磷酸化位点、二聚体接口结构。由此可以看出,该基因属于MADS-box基因家族,其家族基因编码的蛋白都是转录因子。
2.3 系统发育进化分析
将芒果MADS1基因翻译成氨基酸后与番木瓜、葡萄、荔枝等果树的MADS1基因进行同源性分析,从图2中可以看出芒果与这8个物种的同源性为27 %~47 %之间,与番木瓜同源性较高,为48 %,与甜樱桃同源性最低,为27 %。