黄瓜中霜脲氰和喹啉铜的残留检测及膳食风险评估

摘要：为了探明霜脲氰和喹啉铜在黄瓜上的残留特性和使用安全性，采用高效液相色谱分析技术测定了霜脲氰和喹啉铜在黄瓜中的残留动态和最终残留。结果表明：霜脲氰和喹啉铜在黄瓜中的半衰期分别为1.8～2.5 d和2.6～4.1 d。以40%霜脲氰·喹啉铜悬浮剂360、540 g a.i./hm2，于黄瓜生长期连续喷药3、4次，最后一次施药后1、2、3、5 d，黄瓜中霜脲氰残留量均低于0.5 mg/kg（MRL），喹啉铜残留量均低于2.0 mg/kg（MRL）。膳食风险评估结果表明，霜脲氰和喹啉铜的风险商值仅为0.62%和0.40%，处于安全水平。推荐该药在黄瓜上应用的安全间隔期为1 d。

关键词：霜脲氰；喹啉铜；黄瓜；残留；风险评估

中图分类号：TQ450.2+63文献标识号：A文章编号：1001-4942（2014）05-0122-05

霜脲氰（cymoxanil），化学名称2-氰基-N-[（乙酰基）羧基]-2-（甲氧基亚胺基）乙酰胺，是20 世纪70 年代美国杜邦公司研制的一种杀菌剂，主要用于防治黄瓜、葡萄、马铃薯等的霜霉病[1～5]。喹啉铜（oxine-copper）是一种广谱、高效、低残留的内吸性钳合态有机螯合铜杀菌剂，对真菌、细菌性病毒具有良好的预防和治疗作用[6，7]。它与霜脲氰结合使用可以有效防治黄瓜霜霉病，降低霜霉病带来的经济损失，具有很好的市场潜力和广泛的应用前景，但长期、大量使用该农药会对食品和环境带来潜在的危害。

刘明洋等[14]建立了利用高效液相色谱测定葡萄及其土壤中霜脲氰残留量的分析方法；郭利丰等[11]采用气相色谱法对33.5%喹啉铜悬浮剂进行了分析研究；李国平等[13]采用高效液相色谱法测定了混剂中的喹啉铜；周梦春等[7]建立了喹啉铜在番茄中的残留分析方法。虽然关于霜脲氰和喹啉铜在农作物中的残留已有报道[8～14]，但全面系统的研究报道少见，而有关同时测定霜脲氰和喹啉铜在黄瓜中的残留情况尚未见报道。本试验采用高效液相色谱法对40%霜脲氰·喹啉铜悬浮剂在黄瓜及土壤中的残留动态和最终残留展开研究，以探明其在黄瓜上的残留规律，并为其合理使用提供科学依据。

1材料与方法

1.1仪器与试剂

Waters 2695高效液相色谱仪，紫外检测器（Waters公司）；超声波清洗仪（天津奥特赛恩斯仪器有限公司）；水浴振荡器（哈尔滨市东联电子技术开发有限公司）；旋转蒸发仪（上海亚荣生化仪器厂）；电子天平（METTLER）。

40%霜脲氰·喹啉铜悬浮剂（霜脲氰10%，喹啉铜30%，青岛东生药业有限公司提供）；霜脲氰、喹啉铜标准品（纯度分别为99.0%、98.5%，由青岛东生药业有限公司提供）；乙腈、甲醇为色谱纯；氯化钠、氢氧化钠、盐酸均为分析纯。

供试作物：津选优1号、津春4号黄瓜。

1.2田间试验方法

参照农业部农药检定所制定的《农药残留试验准则》[15]和《农药登记残留田间试验标准操作规程》[16]，于2012～2013年分别在山东、河北、安徽三地进行了消解动态试验及最终残留试验。

1.2.1消解动态试验在黄瓜幼果期施药，施药时应保证用于动态试验的黄瓜均匀着药。施药剂量为40%霜脲氰·喹啉铜悬浮剂540 g a.i./hm2，施药后2 h、1、3、5、7、14、21、30、45 d采集黄瓜样品。在试验小区内随机取样，每个小区不同方向及上下不同部位采集6条以上（不少于2 kg）生长正常、无病害、成熟的黄瓜，用不锈钢刀切成1 cm大小的碎块，在不锈钢盆中充分混匀，用四分法切分样品，分取两份150 g的样品，分别装入封口样品容器中并进行标记，于-20℃冰柜中保存。

1.2.2最终残留量试验设两个施药剂量：低剂量为360 g a.i./hm2，高剂量为540 g a.i./hm2。各设3、4次施药，施药间隔期7 d，每处理设3次重复。最后一次施药后1、2、3、5 d采集黄瓜样品及土壤样品。另设空白对照，处理间设保护隔离带。黄瓜样本的采集方法同动态试验。

1.3分析方法

1.3.1样品提取、净化将切碎的黄瓜样品混匀，称取10.0 g于匀浆机中，加入40 mL乙腈，高速匀浆 2 min，过滤至装有7 g氯化钠的具塞量筒中，剧烈振荡2 min，静置20 min，取20 mL上层有机相于平底烧瓶中，减压浓缩至近干，用甲醇定容至5 mL，待测。

1.3.2仪器条件检测器： Waters 2695高效液相色谱仪，紫外检测器；检测波长：250 nm；色谱柱：VP-ODS C18柱，250 mm×4.6 mm；流动相：甲醇-水（V∶V=40∶60）；流速：0.8 mL/min；进样量：20 μL；柱温：30℃。

1.3.3结果计算采用外标法峰面积定量。一定范围内峰面积响应值（Y）和进样量（X）有良好线性关系。用霜脲氰标准品配制0.05、0.1、0.5、1.0、10.0 μg/mL标准溶液，在上述仪器条件下检测，霜脲氰进样量在1×10-9～2×10-7 g之间有良好的线性关系，直线回归式为：Y=3444.5X-1459.2，R2=1.0000。用喹啉铜标准品配制0.05、0.1、0.5、1.0、5.0 μg/mL标准溶液，在上述仪器条件下检测，喹啉铜进样量在10-9～10-7 g之间有良好的线性关系，直线回归式为：Y=3949X-5120.5，R2=0.9993。

1.3.4方法灵敏度、准确度及精密度在上述色谱条件下，霜脲氰、喹啉铜的最低检出量为10-9 g。霜脲氰和喹啉铜在黄瓜中的最低检出浓度均为0.05 mg/kg。用未施药的黄瓜空白样品进行3个浓度的添加回收试验，霜脲氰添加量分别为0.05、0.5、1.0 mg/kg，喹啉铜添加量分别为0.05、1.0、2.0 mg/kg，每个添加浓度进行5次平行测定，设空白对照。霜脲氰和喹啉铜在黄瓜中的添加回收率分别为95.8%～110.9%和108.3%～110.9%，相对标准偏差分别为3.6%～4.5%和3.9%～5.1%。本方法有较好的准确度及精密度，符合农药残留检测要求（色谱图见图1）。

1.4膳食暴露和风险评估

霜脲氰和喹啉铜在黄瓜中的长期膳食风险评估分别由公式（1）、（2）计算得出。

国家估算每日摄入量（NEDI）[17，18]：

式中：Fi为我国一般人群对某一农产品或食品的日摄入量，kg/d；STMRi为规范残留试验中值，本文中采用黄瓜残留试验数据的平均值；Ei和Pi分别为食品的可食部分因子和食品加工因子，本文中不考虑区别，均设为1；ADI为每日允许摄入量，mg/kg bw；bw为体重，kg，我国人均体重一般按63 kg计。当RQ>1时，表示存在不可接受的风险，数值越大，风险越大；RQ<1时，表示风险为可接受，数值越小，风险越小[20]。

2结果与分析

2.1霜脲氰和喹啉铜在黄瓜中的残留消解动态

2012～2013年在山东、河北、安徽进行了40%霜脲氰·喹啉铜悬浮剂在黄瓜中的残留消解规律试验研究，其消解规律均符合一级动力学方程式Ct=C0e-kt。式中：Ct为施药后7 d的残留农药浓度，C0为施药后的原始沉积量，k为消解速率常数，t为施药后的天数。从试验结果看出（表1、表2），霜脲氰在黄瓜中的半衰期为1.8～2.5 d，药后7 d残留量未检出（<0.05 mg/kg）；喹啉铜在黄瓜中的半衰期为2.6～4.1 d，药后14 d消解90%以上或未检出。

2.2霜脲氰和喹啉铜在黄瓜中的最终残留量

40%霜脲氰·喹啉铜悬浮剂360 g a.i./hm2 3次药后1、2 d黄瓜中霜脲氰残留量为0.0551～0.127 mg/kg，药后3、5 d未检出；4次药后1、2 d残留量为0.0682～0.167 mg/kg，药后3、5 d未检表1霜脲氰在黄瓜中

出。40%霜脲氰·喹啉铜悬浮剂540 g a.i./hm2 3次施用后1、2、3 d黄瓜中霜脲氰残留量为0.0578～0.222 mg/kg，药后5 d未检出；4次药后1、2、3 d残留量为0.0761～0.256 mg/kg，药后5 d未检出。所有检出样品残留量均低于最大残留限量0.5 mg/kg。对照区样品霜脲氰残留量均未检出（表3）。

由表4可以看出，40%霜脲氰·喹啉铜悬浮剂360 g a.i./hm2，3次药后1、2、3、5 d黄瓜中喹啉铜残留量为0.0539～0.316 mg/kg；4次药后1、2、3、5 d残留量为0.0604～0.437 mg/kg。40%霜脲氰·喹啉铜悬浮剂540 g a.i./hm2，3次药后1、2、3、5 d黄瓜中喹啉铜残留量为0.0598～0.528 mg/kg；4次药后1、2、3、5 d残留量为0.0969～0.563 mg/kg。所有检出样品残留量均低于最大残留限量2.0 mg/kg。对照区黄瓜样品中均未检出喹啉铜残留（<0.05 mg/kg）。

根据我国国家相关标准的规定，霜脲氰和喹啉铜人体每千克体重每日允许摄入量（ADI）为0.013 mg和0.02 mg，根据《中国居民膳食指南》（2011年修订），我国人均膳食结构中黄瓜（深色蔬菜）每日摄入量一般为0.0915 kg。基于规范残留试验数据进行的国家估算每日摄入量（NEDI）评估结果见表5。由此计算得出，霜脲氰暴露摄入量不超过其ADI的0.62%，喹啉铜暴露摄入量不超过其ADI的0.40%，处于极低的水平，无明显膳食风险。

3结论与讨论

建立了同时测定霜脲氰和喹啉铜在黄瓜中残留的分析方法。其前处理操作简便、省时，便于掌握，进样量在10-9～10-7 g之间有良好的线性关系，霜脲氰、喹啉铜的最低检出量均为10-9 g。

本试验结果表明，霜脲氰在黄瓜中的半衰期为1.8～2.5 d，药后7 d残留量未检出；喹啉铜在黄瓜中的半衰期为2.6～4.1 d，药后14 d消解90%以上或未检出。霜脲氰、喹啉铜在黄瓜中的半衰期短，消解速度较快。根据残留情况推荐40%霜脲氰·喹啉铜悬浮剂用于防治黄瓜霜霉病，最高用药量360 g a.i./hm2，最多施药3次，在黄瓜上的安全间隔期为1 d。

参考文献：

[1]王运浩. 食品农药残留与分析控制技术展望[J]. 现代科学仪器，2003（1）：8-12.

[2]亦 冰. 新颖杀菌剂霜脲氰/唑菌酮的开发及作用特性[J]. 世界农药，2001（5）：32-34.

[3]王维国，常华，张程，等. 气相色谱法测定霜脲氰原药含量[J]. 农药，1997，36（3）：19-20.

[4]李二虎，胡敏. 高效液相色谱法测定黄瓜中霜脲氰和吡虫啉农药残留[J]. 现代农药，2008（4）：42-44.

[5]吴世文，何明远，朱春晖. 18%百菌清·霜脲氰悬浮剂防治黄瓜霜霉病田间药效试验[J]. 农药研究与应用，2009，13（3）：35-36.

[6]陈广艳. 40%喹啉铜·霜脲氰悬浮剂防治黄瓜霜霉病药效试验[J]. 吉林农业科学，2011，36（3）：39-40.

[7]周梦春，周华伦，阿加尔古丽. 番茄中8- 羟基喹啉铜残留量的液相色谱测定[J]. 干旱环境监测，2010，24（4）：205-208.

[8]Grogan H M，Jukes A A. Persistence of the fungicides thiabendazole，carbendazim and Prochloraz-Mn in mushroom casing soil[J]. Pest Manag. Sci.，2003，59（11）：1225-1231.

[9]Chen J，Pawliszyn J B. Solid-phase microextraction coupled to high-performance liquid chromatography [J]. And chem.，1995，67（15）：2530-2533.

[10]Kobayashi H， Matano O， Goto S. Determination of oxine- copper in orange by gas chromatography [J]. Journal of Chromatography， 1989， 474（2）： 381- 387.

[11]郭利丰，肖鸣，黄雅俊. 33.5%喹啉铜悬浮剂的气相色谱分析研究[J]. 现代农药，2011，10（5）：38-39.

[12]周梦春，王颖，蔡磊明，等. 反相高效液相色谱法测定黄瓜和土壤中的喹啉铜残留量[J]. 新疆农业大学学报，2008，31（4）：47-49.

[13]李国平，单炜力，王国联. 高效液相色谱法测定混剂中喹啉铜和噻菌灵[J]. 农药科学与管理，2005，26（9）：4-6.

[14]刘明洋，龚道新，任竟，等. 葡萄和土壤中霜脲氰的残留分析方法[J]. 湖南农业大学学报，2009，35（2）：195-199.

[15]中华人民共和国农业部. NY/T788-2004农药残留试验准则[S]. 北京： 中国农业出版社， 2004.

[16]王运浩， 季颖， 龚勇， 等. 农药登记残留田间试验标准操作规程[M]. 北京：中国标准出版社， 2007.

[17]FAO.Submission and evaluation of pesticide residues data for the estimation of maximum residue levels in food and feed[M]. Rome： FAO， 2009： 123-133.

[18]钱传范. 农药残留分析原理与方法[M]. 北京：化学工业出版社，2011： 435-437.

[19]中国农业科学院农业质量标准与检测技术研究所. 农产品质量安全风险评估： 原理、方法和应用[M].北京：中国标准出版社，2007.

[20]袁玉伟，张志恒，叶志华. 模拟加工对菠菜中农药残留量及膳食暴露评估的影响[J]. 农药学学报，2011，13（2）：186-191.山 东 农 业 科 学2014，46（5）：127～131Shandong Agricultural Sciences山 东 农 业 科 学第46卷第5期张晓艳，等：山东小麦气象灾害预警指标规范

收稿日期：2014-03-07

推荐访问： 喹啉 膳食 黄瓜 残留 风险评估