县级兽医实验室常用消毒灭菌方法及其注意事项

县级兽医实验室承担着口蹄疫、高致病性禽流感、猪瘟、鸡新城疫等重大动物疫病的监测、检测任务及一般动物疫病的临床诊断化验工作。做好日常消毒灭菌是实现兽医实验室生物安全的重要措施之一，也是保护人员和环境不被病原微生物感染和污染的重要手段。笔者凭着多年从事兽医实验室工作的经验，现将兽医实验室日常消毒灭菌方法及其注意事项汇总如下。

1 物理消毒灭菌

主要包括热力消毒灭菌（包括干烤、火焰、灼烧、焚烧、煮沸、压力蒸汽等）、紫外线消毒灭菌、高效过滤器（HEPA）过滤除菌等。

热力消毒灭菌。加热是最常用的清除病原体污染的物理手段。高温能使菌体蛋白凝固变性，抑制细菌酶的活性，使其代谢障碍，结构改变，功能丧失或死亡，从而达到消毒与灭菌的目的。加热可分为干热和湿热两大类。干热可用来消毒灭菌耐受160℃或更高温度2～4小时的物品，没有腐蚀性。湿热适用于耐湿热物品的消毒灭菌，湿热穿透力强。一般微生物在干热80～100℃中经1小时可以杀死，芽孢需160～170℃经2小时即可杀死。干烤是相对湿度在20%以下的高热，由空气导热，传热慢。燃烧法灭菌简单、迅速、彻底，但是对物品的破坏性较大，故应用范围较窄。火焰烧灼仅用于金属、搪瓷类等耐高温的器械的消毒灭菌。焚烧适用于处理动物尸体、解剖组织、某些特殊感染材料（如破伤风、绿脓杆菌、气性坏疽感染的辅料）和其他实验室废弃物，以及没有任何保留价值的物品，如污纸、垃圾等。煮沸适用于玻璃器皿、金属器械的消毒灭菌，是一种简单、有效的消毒方法。一般病原微生物煮沸1小时即可杀灭，56℃作用30分钟即可灭活。压力蒸汽灭菌彻底、高效，适用于耐高温高压，耐湿物品的消毒与灭菌，如被微生物污染的废水、固体废物，防护服、手术器械、药品、细菌培养基等。所有培养物、废弃物、防护用品等在出实验室之前必须经压力蒸汽处理，常用灭菌温度、时间是121℃作用15分钟、115℃作用25分钟、134℃作用4分钟。使用高压灭菌器应注意以下事项：生产厂家是否有资质，根据不同待灭菌物品装载要求、灭菌温度、时间等，规范操作与安全防护，定期监测灭菌效果，设备维修与保养。

紫外线消毒灭菌。紫外线最佳杀菌波长是253.7纳米，简单、高效消毒。适用于室内空气、物体表面的消毒。空气消毒，室内每10平方米安装30瓦紫外线灯管1支，有效距离不超过2米，照射30～60分钟，照射前清扫尘埃，照射时关闭门窗，人员离开。物品消毒，如选用30瓦紫外线灯管，有效照射距离为25～60厘米，照射25～30分钟（物品要摊开或挂起，以扩大照射面）。紫外线消毒应注意以下事项：①紫外线对人体皮肤、眼睛、黏膜有刺激作用，并产生臭氧，因此应在无人时消毒，必要时做好人体防护（如穿戴防紫外线服装、鞋帽、眼镜等）。②紫外线灯管安装数量。③紫外灯的杀菌强度随使用时间逐渐衰减，应定期进行强度监测，当杀菌强度降至70%后要及时更换紫外灯灯管，通常紫外灯使用1 400小时后更换灯管。④紫外线对不同微生物有不同的致死剂量，应根据不同的微生物种类选择适宜的照射时间。

高效过滤器（HEPA）过滤除菌。高效过滤除菌适用于生物安全柜和生物安全实验室的空气净化除菌。对空气中小于等于0.3微米颗粒与微生物的阻留率可达99.97 %以上。高效过滤除菌注意事项：定期更换高效过滤器（HEPA），更换前应先用甲醛或过氧乙酸进行熏蒸消毒，更换时严格做好工作人员防护，换下的过滤装置装入密封袋内由具有资质的单位焚烧处理。

2 化学消毒灭菌方法

主要是通过液体化学试剂杀灭微生物繁殖体或芽孢。利用化学药物的渗透作用，破坏菌体蛋白，干扰菌酶活性，抑制细菌代谢、损害菌膜结构，改变其渗透性，破坏其生理机能来达到消毒灭菌的目的。用于物体表面、空气、污染物品的消毒灭菌。常用擦洗、熏蒸、喷雾、浸泡等消毒方法。

化学消毒灭菌应注意以下事项：①根据微生物种类和数量选择消毒剂的种类和浓度。②不同设备和物品，根据需要可采取不同的消毒方法、相应的消毒剂。③严格掌握消毒剂有效灭菌浓度、作用时间、温度、酸碱度。

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